Cosme I de Médicis accède au pouvoir après l’assassinat du duc Alexandre et s’affirme rapidement comme un homme autoritaire. Il rétablit l’ordre, encourage le commerce et l’industrie et fonde l’ordre des cavaliers de saint Etienne. En 1569, il obtient de Pie V et de l’empereur Maximilien II le titre tant convoité de Grand-duc.
Grand-duc de Toscane de 1609 à 1621, il épouse Marie Madeleine d’Autriche en 1608. Il protège Galilée qui lui dédiera son ouvrage, les Astres médicéens.